鳗鲡疱疹病毒ORF87基因克隆及其多克隆抗体的制备

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摘要：【目的】克隆鳗鲡疱疹病毒（Anguillid herpesvirus，AngHV）ORF87基因，分析其序列特征并制备多克隆抗体，为揭示ORF87基因在AngHV侵染过程中的作用机制提供技术支持。【方法】根据GenBank已公布AngHV参考株（NC_013668）的ORF87基因序列设计引物，从AngHV-FJ株基因组中扩增出ORF87基因，构建重组质粒pMD19-ORF87经酶切鉴定和测序验证后，采用Softberry、ProtParam、CDD、TMHMM、SignalP 5.0、PSORT及BepiPred等在线软件进行生物信息学分析;将ORF87基因克隆至pET-32a表达载体上，转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE检测及Western blotting鉴定;以纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔，制备ORF87多克隆抗体。（剩余16778字）